SweMagrose Protein A Antistof rensede magnetiske perler

 

Produktnavn	Kat. Ingen.	Spec.
Protein A Antistof rensede magnetiske perler	G3656-1ML	1 ml
	G3656-5ML	5 ml

 

 

Protein A er et cellevægsoverfladeprotein fundet i Staphylococcus aureus med en molekylvægt på 42 kDa. Protein A og Protein G er funktionelt ens og kan binde specifikt til pattedyrs immunoglobulin (Ig). Rekombinant protein A og G med passende modifikationer bundet til magnetiske perler kan anvendes til immunpræcipitation eller antistofoprensning. Protein A magnetiske perler er velegnede til immunfældning af humant IgG1, IgG2, IgG4, muse IgG2a, IgG2b, mens Protein G magnetiske perler er egnede til immunfældning af humant IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, muse IgG2, IgGb, IgGb, IgGb. , rotte IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c polyklonale antistoffer. (Se tabel I for specifikke oplysninger)

Dette produkt anvender de selvudviklede og producerede Protein A-proteinmærkede magnetiske perler, sammenlignet med lignende produkter på markedet binder dette produkt antistoffer mere effektivt og har en lavere uspecifik bindingshastighed, sammen med den optimerede buffer, kan det bekvem og effektiv til immunpræcipitationsforsøg; det kan bruges i vid udstrækning til isolering og oprensning af målproteinerne i prøver såsom cellelysater, cellulær sekretionssupernatanter, serum, ascites osv.

 

 

Karakteristika	Beskrivelse
Produktindhold	50 mg/ml magnetiske perler i specifik beskyttende buffer
Magnetisering	Superparamagnetisk
Koblet protein	Rekombinant protein A
MWof protein	~25 kDa (protein A)
Bindende kapacitet	>1mg muse-IgG pr. ml perler
Specificitet	antistoffer fra mange forskellige arter, herunder mus, mennesker, rotter, ko, ged og får
Størrelse på perler	30~150 μm
Elueringsmetode	Syre- eller SDS-PAGE-ladningsbuffer (reduceret) eluering. Bemærk: Hvis elueres med SDS-PAGE loading buffer, vil den lette (~25 kDa) og tunge (~50 kDa) kæde af antistof blive denatureret og frigivet fra perlerne
Anvendelse	IP, Co-IP, Proteinrensning

 

 

Skib med våd is; Opbevares ved 2-8 grad , gyldig i 12 måneder.

 

 

Komponentnummer	Komponent	G3656-1ML	G3656-5ML
G3656	SweMagrose Protein A Antistof rensede magnetiske perler	1 ml	5 ml
Manuel		1 stk

 

 

Antistofoprensningsrelaterede reagensformuleringer henviser til følgende, brugeren kan justeres i henhold til specifikke eksperimentelle forhold.

Komponent	Reagenskombination
Bindende vaskebuffer	PBST: 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2.0 mM KH2PO4, 0,1 % Tween-20
Elueringsbuffer	100 mM Gly, 0,1 % Tween-20, pH 2,5
Neutraliseringsbuffer	1.{1} M Tris-HCl, pH 9.{4}
Konserveringsbuffer	PBST,0,1 % (v/v) Proclin 300

 

Manuel procedure (oprensning af museascites IgG som eksempel)

1. Prøvebehandling: Tag 500 μL ascitesprøve, tilsæt den bindende vaskebuffer for at fylde 500 μL, hvis der er mere proteinpræcipitater i prøven, centrifuger supernatanten til eksperimenter, hvilket kan forbedre antistoffets renhed.

2. Magnetisk perleforbehandling: Vortex de antistofrensede magnetiske perler i 30 s for at resuspendere tilstrækkeligt, tag 100 μL 50 % (v/v) SweMagrose Protein A Antistof-rensede magnetiske perler i et andet nyt 1,5 mL EP-rør, magnetisk aspirer det og kasser det supernatanten, vask den med 1 ml bindende vaskebuffer til to gange, og tag derefter supernatanten efter magnetisk aspiration.

Bemærk: Mængden af ​​perler kan justeres i henhold til mængden af ​​antistof i prøven.

3. Antistofadsorption: tilsæt prøven behandlet i trin 1 til de magnetiske perler i trin 2, vortex og bland godt, anbring EP-røret i en roterende mixer eller drej manuelt røret forsigtigt ved stuetemperatur (ca. 25 grader) for at gøre magnetiske perler i fuld kontakt med prøven, vend den om i 15 minutter, anbring den på magnetseparatorstativet i 30 s, og kassér derefter supernatant.

4. Magnetisk perlevask: tilsæt 1 ml bindende vaskebuffer til EP-røret, resuspender under omrystning og absorber derefter magnetisk i 30 s. Kassér supernatanten og gentag operationen 3 gange.

5. Antistofeluering: Tilsæt 0.5~1.0 mL eluent til EP-rørene med de magnetiske perler vasket som beskrevet ovenfor, og resuspender rørene hurtigt ved pipettering eller vortexing og derefter forsigtigt vend rørene i en omsætningsblander eller i hånden ved stuetemperatur (ca. 25 grader), adskil rørene ved magnetisk sug efter vending i 10 min, og opsaml derefter supernatanten i nye EP-rør.

6. Antistofneutralisering: tilsæt en vis mængde neutraliseringsopløsning til antistofeluatet i trin 5, generelt 1/10 af antistofelueringsvolumenet (f.eks. hvis antistofeluatet er 500 μL, er mængden af ​​neutraliseringsopløsning tilsat 50 μL) , således at pH-værdien af ​​det eluerede antistof opretholdes i et neutralt miljø, hvilket er befordrende for opretholdelsen af ​​den biologiske aktivitet af antistof og undgå antistofinaktivering.

7. Efterbehandling af magnetiske perler: Vask perlerne to gange med elueringsopløsning efter brug, adskil magnetisk og kassér supernatanten; vask derefter tre gange med bindende vaskeopløsning, adskille magnetisk og kassér supernatanten; resuspender perlerne med 200 µL konserveringsopløsning, og opbevar derefter ved 2~8 grader.

 

 

1. Læs venligst disse instruktioner omhyggeligt, før du fortsætter med antistofoprensning.

2. Frys eller centrifuger ikke perlerne, da dette kan forårsage irreversibel aggregering af perlerne.

3. Manuel betjening kræver brug af en magnetisk adskillelsesramme.

 

Tabel 1

Arter	Ig	Protein A	Protein G	I alt Ig	Protein A	Protein G
Menneskelig	IgG1	++++	++++	Menneskelig	++++	++++
	IgG2	++++	++++	Mus	+++	+++
	IgG3	-	++++	Rotte	+/-	++
	IgG4	++++	++++	Kanin	++++	+++
	IgA	++	-	Ged	-	++
	IgD	++	-	Kylling	-	+
	IgE	++	-	Ko	++	++++
	IgM	++	-	Marsvin	++++	++
Mus	IgG1	+	++++	Hamster	+	++
	IgG2a	++++	++++	Hest	++	++++
	IgG2b	+++	+++	Svin	+++	+++
	IgG3	++	+++	Får	+/-	++
	IgM	+/-	-	++++:Stærk Bing
Rotte	IgG1	-	+	++~+++: Mellembinding
	IgG2a	-	++++	+: Svag binding
	IgG2b	-	++	+/-: Svag eller ingen binding
	IgG2c	+	++	-: Ingen binding
	IgM	+/-	-

 

Kun til forskningsbrug. Ikke til brug i diagnostiske eller terapeutiske procedurer!

 

 

Populære tags: swemagrose protein et antistof renset magnetiske perler, Kina swemagrose protein et antistof renset magnetiske perler producenter, leverandører, fabrik