Coomassie Brilliant Blue G250

Coomassie Brilliant Blue G250 kan binde proteiner hurtigt. Den maksimale absorption af Coomassie Brilliant Blue G250 er 488 nm i fri tilstand. Efter binding til protein ændredes den maksimale absorption til 595 nm. Den optiske absorptionsværdi er proportional med proteinindholdet, så den kan bruges til kvantitativ påvisning af protein. Dette produkt kan også bruges som et supplement til G2001 Bradford Assay protein kvantitativ detektionskit.

Send og opbevar ved stuetemperatur, gyldig i 12 måneder.

1. (Valgfrit) Tegning af standardkurve (mikropladelæsermetode): Opløs BSA i vand for at fremstille 0,5 mg/ml proteinstandardarbejdsopløsning. Protein-standardarbejdsopløsningen tilsættes til 96-brøndpladen i niveauer af 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20 μL og derefter gradienten arbejder opløsning suppleres til 20 μL med PBS eller saltvand. Gradientkurverne for proteinkoncentration er 0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 og 500 ug/ml. Hvis der kun laves relative kvantitative sammenligninger, kræves der ingen standardkurver.

2. Forbered prøven, der skal testes: Proteinprøven, der skal testes, fortyndes passende (proteinkoncentrationen af ​​prøven kan påvises ved præ-eksperiment til at være inden for standardkurvens område for at sikre pålideligheden af ​​testresultatet ), og 20 μL af hver prøve tilsættes til 96-brøndspladen. Prøven, der skal testes, skal fortyndes i den samme opløsning som proteinstandarden.

3. Detektion: 200 μL Coomassie brilliant blue G250-opløsning tilsættes til hver brønd og blandes grundigt (96-brøndpladen kan placeres på oscillatoren i 30 s). Efter 3-5 min ved stuetemperatur bruges standardkurven nr. 0 som reference, og den kolorimetriske måling udføres ved 595 nm bølgelængde, og absorbansværdien for hver brønd registreres.

4. Beregning: Gradientproteinindholdet (ug/mL) i standardkurven tages som abscisse, og lysabsorptionsværdien tages som ordinaten for at tegne standardkurven. I henhold til prøvens absorbansværdi kan proteinkoncentrationen af ​​prøven, der skal måles i den tilsvarende brønd, findes på standardkurven (ug/mL), og derefter ganges med prøvens fortynding, den faktiske proteinkoncentration på prøven, der skal måles.

5. Desuden: hvis spektrofotometeret bruges til at bestemme, bruges glasreagensglasset eller det kolorimetriske glasglas som reaktionsbeholder til at lave standardkurver. Efter korrekt fortynding af proteinprøven, der skal testes, tilsættes den til et nyt glasreagensglas eller kolorimetrisk rør med en prøvestørrelse på 1 mL. Tilsæt 3 mL Coomassie brilliant blue G250-opløsning til standardkurvegradientglasset og prøverøret, bland grundigt, lad det stå ved stuetemperatur i 3-5 min., og brug derefter spektrofotometer til kolorimetrisk detektion.

6. Detektion: Spektrofotometerets bølgelængde er indstillet til 595 nm, og standardkurven og prøven, der skal testes, nulstilles med standardkurve nr. 0-røret som reference. Standardkurver tegnes som beskrevet i trin 4, og proteinkoncentrationer i prøverne, der skal testes, beregnes.

1. Produktet skal genoprettes til stuetemperatur før brug og blandes på hovedet for at undgå at påvirke detektionsfølsomheden.

2. For din sikkerhed og sundhed skal du bære sikkerhedsbriller, handsker eller beskyttelsestøj.

Kun til forskningsbrug!

Populære tags: coomassie brilliant blue g250, Kina coomassie brilliant blue g250 producenter, leverandører, fabrik