Virus DNA/RNA ekstraktionssæt

 

Produktnavn	Kat.nr.	Spec.
Virus DNA/RNA ekstraktionssæt	G3647-50T	50T

 

 

Sættet er designet til hurtig isolering af forskellige virale DNA/RNA fra serum, plasma, urin, supernatant af cellekulturmedium, virusstam og inficeret væv. Ved at gøre brug af egenskaberne ved nukleinsyreadsorptionssøjlen, der reversibelt binder til nukleinsyren, koblet med et specielt buffersystem, får nukleinsyren lov til at binde specifikt til membranmatrixen, og proteiner, cellefragmenter og andre forurenende stoffer skylles effektivt, og til sidst elueres nukleinsyren fra adsorptionssøjlen med nukleasefrit vand. Det opnåede højkvalitets DNA/RNA kan anvendes direkte i nedstrøms PCR, cDNA-syntese, RT-qPCR og andre molekylærbiologiske eksperimenter.

 

 

Proteinase K og Carrier RNA sendes med våd is og opbevares ved -20 grad . Andre reagenser blev sendt og opbevaret ved stuetemperatur; gyldig i op til 1 år.

 

 

Komponentnummer	Komponent	G3647-50T
G3647-1	BufferVLB	10 ml
G3647-2	Proteinase K	1 ml
G3647-3	Bærer-RNA	150 μL
G3647-4	BufferVWA	12 ml
G3647-5	Buffer VWB	15 ml
G3647-6	Nukleasefrit vand	12 ml
G3647-7	Spin kolonner med opsamlingsrør	50
Manuel		Ét eksemplar

 

 

1. Hvis BufferVLB og BufferVWA udfælder, bedes du opvarme det til 37 grader og bruge det, når det er genoprettet til stuetemperatur.

2. Tilsæt venligst 18 mL vandfri ethanol til BufferVWA og 60 mL vandfri ethanol til BufferVWB før første brug.

3. Bærer-RNA kan underpakkes og opbevares i -20 grad før første brug, og gentagen frysning og optøning bør undgås.

4. Forkøl venligst kværnen, hvis du maler væv med en kværn.

 

 

1. Prøveforberedelse:

en. Lysis af serum, plasma, urin, supernatant af cellekulturmedium og virusstam: Prøvetagning af 10-200 μL serum, plasma, urin, supernatant fra cellekultur eller virusstam. Den oprindelige mængde på mindre end 200 μL kan genopfyldes til 200 μL med PBS eller nukleasefrit vand.

b. Lysis af inficeret væv: Placer 10~20 mg frisk eller kryokonserveret inficeret væv i et 1,5 mL nukleasefrit centrifugerør indeholdende 2~3 stk 3 mm slibeperler (anbefalet G0203) eller brug specielle sliberør (anbefalet HT-200- M). Placer øjeblikkeligt centrifugerøret eller malerøret, der indeholder vævet i flydende nitrogen, og mal derefter vævet grundigt for at homogenisere ved lav temperatur ved hjælp af en vævskværn (anbefalet KZ-5F-3D, hvis vævet er ikke grundigt homogeniseret, vil udbyttet og kvaliteten af ​​DNA/RNA blive påvirket). Tilsæt 200 μL PBS eller nukleasefrit vand efter formaling.

2. Tilsæt 200 μL BufferVLB, 20 μL Proteinase K og 3 μL Carrier RNA. Efterblandet grundigt, inkuber ved 56 grader i 10 min.

3. Tilsæt 200 μL vandfri ethanol, bland på hovedet.

4. Overfør opløsningen fra det foregående trin til Spin Column, centrifuger ved 12,000 rpm i 1 min, og kassér filtratet fra opsamlingsrøret.

5. Tilføj 500 μL buffer VWA til Spin Column, centrifuger ved 12,000 rpm i 1 min, og kassér filtratet fra opsamlingsrøret.

6. Tilføj 700 μL buffer VWB til Spin Column (tilsæt venligst Buffer VWB langs Spin Column-rørvæggen for at hjælpe med at skylle restsaltet på rørvæggen). centrifuger ved 12,000 rpm i 30 s, og kasser filtratet.

7. Gentag trin 6.

8. Sæt Spin Column på opsamlingsrøret, centrifuger ved 12,000 rpm i 2 min.

9. Overfør Spin Column til et nyt Nuclease-frit 1,5 mL centrifugerør, åbn låget i 3~5 min ved stuetemperatur, så den resterende ethanol fra Spin Column kan fordampes fuldstændigt.

10. Tilsæt 30~50 μL nukleasefrit vand til centrifugalrøret, lad det stå ved stuetemperatur i 5 minutter, centrifuger ved 12, 000 rpm i 2 minutter ved stuetemperatur for at opsamle RNA-opløsning. For at få en højere koncentration af RNA kan du også tilføje den første eluent tilbage til RNA Spin Column, derefter stå ved stuetemperatur i 5 minutter og centrifugere i 2 minutter for at opsamle RNA igen.

 

 

1. Læs venligst produktmanualen omhyggeligt før brug.

2. På grund af tilsætningen af ​​Carrier RNA i ekstraktionsprocessen kan mængden ikke bestemmes ved elektroforese eller absorptometer.

3. Bærer-RNA'et fra dette sæt er RNA'et fra E. coli, som hovedsageligt skal forbedre genvindingseffektiviteten af ​​spornukleinsyre og forhindre nedbrydning af spor-RNA. Hvis PCR-primerne har høj homologi med bærer-RNA, kan primerne redesignes.

4. Inden eluering skal ethanol være fuldstændigt fordampet for at undgå påvirkning af resterende ethanol på nedstrømsforsøg.

5. Tør ikke i lang tid, for ikke at påvirke effektiviteten af ​​nukleinsyreeluering.

6. For din sikkerhed og sundhed skal du bære en laboratoriefrakke og engangshandsker.

 

Kun til forskningsbrug!

 

 

Populære tags: virus dna/rna ekstraktionssæt, Kina virus dna/rna ekstraktionssæt producenter, leverandører, fabrik