MTT Cell Levedygtighed Assay Kit

Dette produkt MTT-detektionskit bruges i vid udstrækning til bestemmelse af celleproliferation og aktivitet samt påvisning af lægemiddelcytotoksicitet. Det fulde navn på MTT er 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazoliumbromid og det kinesiske navn er thiazolylblåt. Princippet i assayet er, at enzymet succinatdehydrogenase i mitokondrierne i levende celler kan reducere det eksogene substrat MTT til vanduopløseligt blåviolet snavs (Formazan) og deponere det i cellerne, mens døde celler ikke har denne funktion. Dimethylsulfoxid (DMSO) blev derefter brugt til at opløse de snavsede aflejringer i cellerne, og absorbansværdierne blev målt ved 490 nm eller 570 nm under anvendelse af et enzymmærket instrument. Inden for et bestemt celleområde er mængden af ​​dannet formazan proportional med antallet af levende celler. Antallet af levende celler måles ved absorbansværdien (OD-værdi). Jo større OD-værdien er, jo flere levende celler er, og jo mere aktiv cellen er (hvis den måles for lægemiddeltoksicitet, jo mindre giftig er stoffet). Hvis du bruger dette kit til at påvise cellelevedygtighed, skal supernatanten fjernes efter reaktionen, så det kan ikke bruges til påvisning af suspenderede celler. Til påvisning af suspenderede celler anbefales det at bruge produkter (G4103 CCK-8 kit) i vores virksomhed.

Skib med våd is; opbevares ved 4 grader væk fra lys, gyldigt i 3 måneder; eller opbevares ved -20 grader væk fra lys, gyldigt i 12 måneder. Undgå gentagen frysning og optøning.

1. Efter at cellerne klæber til væggen, udføres dosering og transfektion i henhold til det eksperimentelle design;

2. Tilsæt 20 μL MTT-arbejdsopløsning til hver brønd, og inkuber i 4 timer i en celleinkubator.

3. Fjern forsigtigt supernatanten, sug ikke de lilla krystaller op i bunden.

Bemærk: Efter inkubation vil en lille mængde lilla krystaller vises i bunden af ​​brøndpladen, som kan observeres under et 40x mikroskop.

4. Tilføj 100 μL DMSO til brøndpladen, inkuber ved 37 grader i ca. 15 minutter (du kan banke på bunden af ​​pladen med fingeren for at ryste let), indtil alle de lilla krystaller er opløst. Hvis de lilla krystaller er mindre og mindre, vil opløsningstiden være kortere; hvis de lilla krystaller er større, kan opløsningstiden forlænges passende;

5. Aflæs absorbansen ved 490 nm eller 570 nm. Hvis et 570 nm filter ikke er tilgængeligt, kan et 560-600 nm filter bruges.

1. Før brug skal bundfald, der kan dannes ved lavere temperatur i DMSO, resolubiliseres fuldstændigt ved 37 grader i et vandbad.

2. Dette sæt anvender reduktionsreaktionen katalyseret af dehydrogenase. Reduktionsmidler eller antioxidanter, der kan interferere med analysen, bør fjernes fra prøver, der skal testes.

3. For din sikkerhed og sundhed skal du bære sikkerhedsbriller, handsker eller beskyttelsestøj.

Kun til forskningsbrug!

Populære tags: mtt celle levedygtighed assay kit, Kina mtt cell levedygtighed assay kit producenter, leverandører, fabrik